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Vitamin C, auch bekannt als Ascorbinsäure oder L-Ascorbinsäure, ist ein essentieller Nährstoff, der an der Reparatur von Geweben und der enzymatischen Produktion bestimmter Neurotransmitter beteiligt ist. Er ist für das Funktionieren verschiedener Enzyme und die Immunabwehr erforderlich und ist außerdem ein wichtiges Antioxidans. Dieser Nährstoff ist in vielen Lebensmitteln enthalten und wird häufig als Nahrungsergänzungsmittel verwendet.

Diese Application Note beschreibt die photometrische Bestimmung von Ascorbinsäure gemäß der Norm ISO 6557-2. Um die Objektivität bei der Bestimmung des Äquivalenzpunktes und die Reproduzierbarkeit der Ergebnisse zu erhöhen, wird ein automatischer Titrator verwendet, der mit einem photometrischen Sensor, der Optrode, ausgestattet ist. Das Titriermittel 2,6-Dichlorphenol-Indophenol (DCIP oder DPIP) dient gleichzeitig als Titriermittel und Indikator.

Die Methode wird für Orangen- und Blutorangensaft demonstriert.

Zunächst wird der Probe Oxalsäure zugesetzt. Anschließend wird die Probe zentrifugiert, um das Fruchtfleisch zu entfernen.

907 Titrando mit tiamo. Beispielaufbau für die photometrische Bestimmung von Vitamin C.
Abbildung 1. 907 Titrando mit tiamo. Beispielaufbau für die photometrische Bestimmung von Vitamin C.

Diese photometrische Analyse wird mit einem Titrando-System 907 durchgeführt, das mit einem Magnetrührer und einer Optrode für die Indikation ausgestattet ist.


Ein Aliquot der vorbereiteten Probe wird in den Titrierbecher überführt, gefolgt von Oxalsäure. Dann wird die Lösung mit standardisiertem 2,6-Dichlorphenol-Indophenol (DPIP) bis nach dem ersten Äquivalenzpunkt titriert.

Die Analyse liefert akzeptable und reproduzierbare Ergebnisse und gut definierte Titrationskurven. Die Ergebnisse sind in Tabelle 1 zusammengefasst. Ein Beispiel für eine Titrationskurve ist in Abbildung 2 dargestellt.

Tabelle 1. Mittlerer Vitamin-C-Gehalt von Orangensäften, bestimmt durch Titration (n = 3).
Probe Mittelwert / mg/L SD(rel) in %
Orangensaft 363.5 1.28
Blutorangensaft 570.8 1.29
Abbildung 2. Beispiel einer Titrationskurve für die Vitamin-C-Bestimmung in Blutorangensaft.

Nach der Probenextraktion und Zentrifugation lässt sich der Vitamin-C-Gehalt in Orangensäften gemäß ISO 6557-2 leicht bestimmen, indem DPIP als Titriermittel und ein photometrischer Sensor für die Indikation verwendet werden. Auf diese Weise kann die lachsrosa Färbung des Endpunkts unabhängig vom Bediener und von der Probenfarbe reproduzierbar und objektiv bestimmt werden. Darüber hinaus ermöglicht die Verwendung eines photometrischen Sensors den Einsatz eines automatisierten Systems und damit einen erhöhten Probendurchsatz.

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