El fentión es un insecticida de uso múltiple que se utiliza en muchos países para la lucha contra los mosquitos. Aunque está designado como moderadamente tóxico para los humanos, el fentión es altamente tóxico para las aves, los peces y los invertebrados acuáticos. Para minimizar la exposición humana y el envenenamiento involuntario de la fauna, la Agencia de Protección Ambiental de los Estados Unidos ha clasificado el fentión como un insecticida de uso restringido. Sin embargo, la fumigación generalizada de los olivares en los países mediterráneos da lugar a que los aceites de oliva superen ocasionalmente los límites máximos de residuos establecidos para las aceitunas.

El Misa (Metrohm Instant SERS Analyzer) logra fácilmente la detección sensible de trazas de fentión en aceite de oliva con aditivos después de una simple extracción con disolvente orgánico. Esta Application Note presenta un excelente ejemplo de cómo la señal de los sustratos SERS puede competir con la señal objetivo a niveles de detección muy bajos. Esta es una ocurrencia común que Misa y Misa Cal abordan a través de la asignación de picos en las bibliotecas SERS de Misa Cal. Esta es solo una de las ventajas integradas que hacen que Misa sea tan fácil de usar.

Esta nota de aplicación describe un procedimiento de prueba simulado para detectar fentión en aceite de oliva. El ensayo se basa en la adquisición de espectros específicos de SERS para fentión en extractos de acetonitrilo utilizando Misa y nanopartículas de oro (Au NP).

Para establecer un espectro de referencia, se analizó el estándar de fentión puro a una concentración de 100 μg/mL en metanol usando Au NP. El espectro SERS único que se muestra en Figura 1 se puede utilizar para crear una entrada de biblioteca para fentión.

Se utilizó una solución madre de fentión en metanol para enriquecer el aceite de oliva, creando una gama de muestras de prueba: 100, 10, 5 y 1 μg/mL y 500 ng/mL. A cada alícuota se le añadieron 0,5 mL de ciclohexano, seguido de 0,5 mL de acetonitrilo y 50 μL de agua. Los contenidos se mezclaron mediante agitación y cada vial se dejó reposar durante 10 minutos para permitir la separación de fases. Con una pipeta, se retiraron con cuidado 200 μl de la capa inferior de acetonitrilo y se transfirieron a un vial nuevo. El acetonitrilo se eliminó mediante calentamiento por evaporación. El residuo seco se resuspendió mediante la adición secuencial de 450 μL de Au NP y 50 μL de 0,5 mol/L de NaCl, se agitó para mezclar y luego se insertó en el accesorio del vial en Misa para la medición.

Los espectros superpuestos corregidos de la línea de base adquiridos para el rango de concentración de fentión utilizado para aumentar el aceite de oliva muestran una detección de hasta 500 ng/mL (Figura 2).

Tras una cuidadosa consideración, Figura 2 parece ser un compuesto de dos fracciones distintas. Es bien sabido que las capacidades de detección de trazas provienen de la mejora de la señal a través de la interacción del analito objetivo con el sustrato SERS. Cada sustrato SERS contribuye con su propia señal a un espectro, que puede ser distinto en estos niveles muy bajos de detección. Una inspección más cercana de los picos más fuertes en esta figura revela la relación inversa esperada entre el aumento de la intensidad de los picos de fentión y la disminución de la señal del sustrato, visto en figura 3.

Las entradas de la biblioteca dedicada de Misa Cal incluyen asignaciones de picos para cada sustancia, lo que permite la identificación del objetivo incluso en lo que parece ser un espectro mixto.

Detección de fentión en el campo

Usando una pipeta, agregue 4 gotas de aceite de oliva a un vial de 2 ml. Llene el vial hasta la mitad con ciclohexano y agite hasta que el aceite se disuelva. Agregue acetonitrilo hasta que el vial esté casi lleno, agite y deje reposar durante 10 minutos. Con una pipeta limpia, decantar con cuidado una porción de la capa inferior dentro vial limpio. Calentar para eliminar el disolvente. Agregue Au NP a este vial hasta ~ 1/3 lleno, seguido de 3 gotas de solución de NaCl. Tape y agite suavemente el vial para mezclar, luego insértelo en el accesorio del vial en Misa para medir.

El límite para el fentión en el aceite de oliva es de 1 μg/mL en los EE. UU. Basado en el protocolo simple informado en esta nota de aplicación, Misa proporciona suficiente sensibilidad para detectar fentión en concentraciones que cumplen con el límite establecido para las aceitunas.

Desde los flujos de trabajo automatizados incluidos en ID Kit OP hasta la operación de un solo toque y las bibliotecas de pesticidas dedicadas, Misa Cal es un poderoso compañero de Misa en la identificación de adulterantes alimentarios a nivel de trazas.