L'auramina O (AO) è un colorante industriale utilizzato per un'ampia gamma di prodotti, nonché come colorante fluorescente per il rilevamento di batteri acidoresistenti nei campioni clinici. Dato il suo colore giallo intenso, l'AO è apprezzato anche come additivo per migliorare l'aspetto di prodotti alimentari trattati in modo illecito. Il curry in polvere è un probabile bersaglio di tale adulterazione, poiché è una miscela giallo brillante di diverse spezie. I rischi per la salute associati all'ingestione e persino alla manipolazione impropria di AO includono un alto rischio di diversi tumori, tossicità neurale ed epatica e persino la morte. Nonostante i divieti di utilizzo dell'AO come additivo alimentare, i test di monitoraggio indicano che viene utilizzato sistematicamente come adulterante in alimenti e spezie.
Con l'impiego di Misa (Metrohm Instant SERS Analyzer) è possibile ottenere un rilevamento rapido e sensibile dell'AO nel curry in polvere in un formato di analisi semplice.
Misa è uno strumento versatile per il rilevamento rapido e accurato dei coloranti alimentari vietati. Questa Application Note descrive nel dettaglio una facile procedura di estrazione per rilevare l'AO nel curry in polvere adulterato.
Per stabilire uno spettro di riferimento per AO, è stato analizzato uno standard puro in acqua alcalina (100 μg/mL, pH 13) utilizzando nanoparticelle d'oro (Au NP). Lo spettro SERS unico mostrato in Figura 1 può essere utilizzato per creare una voce nella libreria per AO.
In un test simulato per AO in polvere di curry, AO solido è stato mescolato con il curry in polvere acquistato per ottenere a intervallo di concentrazione dei campioni di prova addizionati: 1000, 100, 10, 5 e 1 μg/g. L'estrazione liquida di AO era eseguita aggiungendo 1 mL di 0,1 mol/L NaOH a 100 mg di campione in una fiala di vetro. Questo impasto è stato miscelato e lasciato riposare per 2 minuti. Acetato di etile (EA, 1 mL) e NaCl (100 mg) sono stati aggiunti alla fiala, che è stato poi leggermente capovolto alcune volte (non agitare energicamente) per promuovere l'estrazione di AO nello strato EA. Dopo 10 minuti, 50 μL di EA superiore lo strato è stato aggiunto a una fiala contenente 400 μL di Au NP e 50 μL di 0,5 mol/L NaCl. La fiala è stata agitata per mescolare e subito inserito nell'attacco del flaconcino su Misa per la misurazione.
| Strumento | Acquisizione | ||
|---|---|---|---|
| Firmware | 0.9.33 | Potenza laser | 5 |
| Software | Misa Cal V1.0.15 | int. Ora | 10 sec |
| Misa Fiala Allegato | 6.07505.040 | medie | 10 |
| Kit di identificazione - Au NP | 6.07506.440 | Raster | SU |
Gli spettri SERS sovrapposti e corretti al basale di estratti basici di EA di curry in polvere addizionati con concentrazioni variabili di AO dimostrano un rilevamento affidabile fino a 1 μg/g (figura 2). Nota: i picchi negli spettri AO SERS mostrano variazioni relative al solvente e al pH.
Rilevazione di auramina O sul campo
Usando l'estremità grande della paletta, aggiungi 3-4 misurini di campione in una fiala da 2 ml. Aggiungi la soluzione di NaOH alla fiala fino a metà. Aggiungi3-4 misurini di NaCl solido, quindi riempi la fiala verso l'alto con acetato di etile. Copri e inverti la fiala un paio di volte per mescolare, ma non agitare la fiala vigorosamente. Lascia riposare il campione per 5 minuti, appena si formeranno strati distinti. Riempi una fiala pulita a metà con Au NP. Usando le pipette, aggiungi 2 gocce ciascuna sullo strato superiore della soluzione campione e della soluzione di NaCl a Au NPs, tappa e agita delicatamente la fiala per mescolare. Inserisci nell'attacco della fiala su Misa per la misurazione.
| Kit ID - Au NP | 6.07506.440 |
|---|---|
| include: | Nanoparticelle d'oro (Au NP) |
| Notizia in anticipo | |
| Pipette monouso | |
| Fiale di vetro da 2 ml | |
| Reagenti | |
| Soluzione di NaOH | 0,4 g NaOH in 100 ml di acqua |
| NaCl solido | |
| Acetato di etilene | |
| soluzione di NaCl | 3 g di NaCl in 100 ml di acqua |
| Impostazioni di prova | Utilizzo Kit ID OP su MISA |
Il rilevamento facile e sensibile di AO nel curry in polvere adulterato è stato dimostrato utilizzando Misa. Questa analisi richiede una formazione minima dell'utente e consumabili minimi, il che la rende una piattaforma analitica ideale per i test di controllo qualità in loco negli impianti di produzione, spedizione e ricezione di alimenti. La portabilità e la facilità d'uso di Misa nel rilevamento di tracce di coloranti illeciti superano le complesse procedure di estrazione e analisi in un ambiente di laboratorio.
Condividi l'applicazione
Download PDF