Rilevamento di tracce di eritrosina B nello zucchero

L'eritrosina B (EB), nota anche come colorante rosso n. 3, è un colorante sintetico approvato per l'uso nelle caramelle negli Stati Uniti e nei prodotti farmaceutici e cosmetici nell'UE e altrove. Tuttavia, alcuni studi su roditori hanno suggerito che l'ingestione di EB può incentivare lo sviluppo di un tumore alla tiroide. L'EB potrebbe inoltre essere tra i fattori alimentari che contribuiscono all'ipercinesi nei bambini. L'OMS raccomanda un'assunzione giornaliera di EB inferiore a 0,1 mg/kg di peso corporeo. Sebbene il consumo di EB al di sotto di questa soglia sia considerato accettabile, è importante monitorare l'uso di EB per garantire che le linee guida dietetiche siano appropriate e adeguatamente applicate.

Con Misa (Metrohm Instant SERS Analyzer), il rilevamento sensibile e selettivo di EB viene dimostrato in un semplice formato di analisi facilmente adattabile per i test di sorveglianza in loco. La capacità di ottenere risultati rapidi con una piattaforma di test portatile raccomanda Misa come alternativa competitiva ed economica alle tecnologie di laboratorio (ad es. CE, HPLC) attualmente impiegate per rilevare l'EB negli alimenti.

Misa è uno strumento di screening portatile per rilevare gli additivi alimentari, compresi i coloranti chimici. In questa Application Note, viene utilizzata una facile procedura di estrazione e analisi per rilevare l'EB nello zucchero addizionato e nello zucchero decorativo colorato.

Figure 1. Spettro di riferimento SERS standard dell'eritrosina B.

Per stabilire uno spettro di riferimento per EB, è stato analizzato uno standard puro in acqua (5 μg/mL) utilizzando nanoparticelle d'oro (Au NPs). L'unico spettro SERS mostrato in Figura 1 può essere utilizzato per creare un voce nella libreria per EB.

https://metrohm.scene7.com/is/image/metrohm/5161?ts=1641568414271&dpr=off

Per simulare il test per l'EB in un prodotto alimentare, l'EB solido è stato accuratamente miscelato con zucchero puro per preparare un intervallo di concentrazione di campioni di prova: 100, 50, 25 e 10 μg/g. Per estrarre EB, 100 mg di ciascun campione secco sono stati sciolti in 1 mL di etanolo e lasciati riposare per 5 minuti. Un campione di prova è stato preparato pipettando 100 μL dell'estratto etanolico in una fiala di vetro contenente 800 μL di Au NPs e 100 μL di 0,5 mol/L NaCl. Il campione è stato agitato e collocato nell'attacco della fiala Misa per l'analisi.

Per testare l'EB in Betty Crocker Pink™, uno zucchero decorativo colorato disponibile in commercio, sono stati preparati dei campioni come descritto in precedenza.

**Tabella 1.** Parametri sperimentali
Strumento		Acquisizione
Firmware	0.9.33	Potenza laser	5
Software	Misa Cal V1.0.15	int. Ora	1 s
Misa Fiala Allegato	6.07505.040	medie	10
Kit di identificazione - Au NP	6.07506.440	Raster	SU

Gli spettri SERS sovrapposti per estratti etanolici di zucchero addizionati con EB dimostrano un rilevamento fino a 10 μg/g.

Figure 2. Spettri SERS di EB sovrapposti, con linea di base, sottratti in background nello zucchero con Misa e Au NP.

Sulla base del confronto dei picchi con gli spettri di riferimento registrati per i campioni di zucchero addizionati, viene confermata la presenza di EB nello zucchero rosa. Nota: lievi variazioni di picco, come evidente in Figura 3, non compromettono le capacità di identificazione della libreria.

Figure 3. Spettri SERS di EB sovrapposti, con linea di base, sottratti in background nello zucchero con Misa e Au NP.

Rilevazione di eritrosina B in campo

Usando l'estremità grande della paletta, aggiungi 3-4 misurini di campione in una fiala da 2 ml. Aggiungi l'etanolo alla fiala fino a metà. Chiudi e agita delicatamente la fiala per mescolare, poi lascia riposare il campione per 5 minuti. Riempi un fiala pulita a metà con Au NPs. Usando le pipette, aggiungi 2 gocce ciascuno tra la soluzione del campione e la soluzione di NaCl ad Au NPs,tappa e agita delicatamente la fiala per mescolare. Inserisci l'attacco della fiala su Misa per la misurazione.

**Tabella 2.** Requisiti per il protocollo di test sul campo
Kit ID - Au NP	6.07506.440
include:	Nanoparticelle d'oro (Au NP)
	Notizia in anticipo
	Pipette monouso
	Fiale di vetro da 2 ml
Reagenti
etanolo
soluzione di NaCl	3 g di NaCl in 100 ml di acqua
Impostazioni di prova	Utilizzo Kit ID OP su MISA

Misa fornisce una soluzione efficace per rilevare l'EB negli alimenti trasformati. Questa analisi richiede una formazione minima dell'utente e materiali di consumo, fornendo così una metodologia analitica semplice per la sorveglianza chimica in loco in ambienti di test di risorse sia ad alta che a bassa risorsa.

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