元の言語のページへ戻りました
見積書依頼

FDA は最近、医薬品中のニトロソアミン不純物を管理するためのガイダンスを発行しました [1]。たとえ微量であっても、薬剤中に発がん性のあるニトロソアミンが存在すると、患者の安全が脅かされてしまいます。医薬品およびプロセス中の亜硝酸塩濃度を制御すると、ニトロソアミンの生成を防ぐことができるため、医薬品およびその原材料中の亜硝酸塩を高感度に分析する方法は不可欠です。

多くの場合、ジメチルアミンはさまざまな薬剤の合成に使用されます。酸性条件下では亜硝酸塩と反応してニトロソアミンを形成します[2]。これは、一般的な賦形剤であるヒドロキシプロピル メチルセルロース (ヒプロメロース) の製造にも当てはまります。このアプリケーションノートでは、Metrosep A Supp 10 カラムと 215 nm での直接 UV/VIS 検出を使用したイオンクロマトグラフィ (IC) によるヒドロキシプロピル メチルセルロース中の亜硝酸塩の定量について説明します。サンプル前処理には、マトリックス除去付きメトロームインテリジェント濃縮テクニック（Metrohm Intelligent Pre-Concentration Technique with Matrix Elimination ；MiPCT-ME）を使用します。

ヒドロキシプロピル メチルセルロース (ヒプロメロース) は製薬会社から粉末として入手しました。0.1 g のサンプルを正確に秤量し、5.0 mL の超純水 (UPW) が入った清潔な 10 mL メスフラスコに移しました。ボルテックスミキサーを使用して約２０分間溶解し、フラスコの標線までＵＰＷを満たしました。調製したサンプル溶液を 0.2 μm シリンジフィルターで濾過し、分析前に密閉条件下でサンプルプロセッサー内に保管しました。

1000 mg/L NIST 認定規格物質 (Sigma TraceCERT No. 67276) から調製された4 μg/L NO2- を使用して1点校正を行いました。  

940 Professional IC Vario (中央)、947 Professional UV/VIS Detector Vario SW (中央上部)、858 Professional Sample Processor (右)、ドシーノ（左）、MiPCT-ME を含むシステム。
Figure 1. 940 Professional IC Vario (中央)、947 Professional UV/VIS Detector Vario SW (中央上部)、858 Professional Sample Processor (右)、MiPCT-ME を含む機器セットアップ。ドシーノ（左）。

サンプルは、USP <621> [3]に記載されているクロマトグラフィ分離技術で分析しました(図1）。  MiPCT-ME 装置 を表1のメソッドパラメータに基づいて使用しました。 2 mL のサンプルを Metrosep A PCC 2 HC/4.0 で事前濃縮し、3 mL の超純水でマトリックスを除去しました。

注入後、陰イオン成分を Metrosep A Supp 10 - 250/4.0 カラム で 45 分以内に均一条件で分離しました。UV/VIS 検出器のシグナルは 215 nm で記録しました。メソッドの精度確認は、添加試験によって行いました。サンプルに亜硝酸塩標準物質を 2 つの濃度レベル (1.0 μg/L と 4 μg/L) で添加し、回収値を評価しました。

表1。 ヒドロキシプロピル メチルセルロース (ヒプロメロース) 中の亜硝酸塩不純物を測定するための IC メソッド パラメーター。

カラム メトロセップ A サップ 10 - 250/4.0
溶離液 5.0mmol/L炭酸ナトリウム
5.0mmol/L水酸化ナトリウム
流量 1.0mL/分
カラム温度 45℃
注入量 2 mL (前濃縮量)
検出 215 nm での UV/VIS 検出

ヒドロキシプロピル メチルセルロース中の亜硝酸塩を定量しました（図2）。このメソッドは、サンプルマトリックス中に存在する微量の亜硝酸塩を定量するのに十分な感度を示しました。2段階の添加試験によりメソッドの精度が確認し、回収率は80 ～ 120%でした。

Figure 2. ヒドロキシプロピルメチルセルロースサンプル中の 288 μg/kg 亜硝酸塩のクロマトグラム。

USP <621> に準拠したヒドロキシプロピル メチルセルロース中の亜硝酸塩の定量は、ご紹介した ICメソッドにより可能であることがわかりました。サンプルを前濃縮することでより感度が上がり、微量の亜硝酸塩を正確に測定できます。また、インラインマトリックス除去は、サンプル注入前に妨害となるサンプルマトリックスを除去し、測定結果をさらに向上させます。他のマトリックス成分と亜硝酸塩はMetrosep A Supp 10 カラムで分離でき、メソッドの精度は添加試験によって確認しました。

この IC メソッドは、賦形剤ヒドロキシプロピル メチルセルロースを含む医薬品製造プロセスにおける不純物亜硝酸塩の品質管理に適しています。


  1. U.S. Department of Health and Human Services Food and Drug Administration; Center for Drug Evaluation and Research (CDER). Control of Nitrosamine Impurities in Human Drugs - Guidance for Industry. Pharmaceutical Quality/Manufacturing Standards/ Current Good Manufacturing Practice (CGMP) 2021.
  2. U.S. Pharmacopeia. USP-NF Nitrosamine Impurities. General chapter. https://doi.org/10.31003/USPNF_M15715_02_01.
  3.  〈621〉 Chromatography. https://doi.org/10.31003/USPNF_M99380_01_01.

お問い合わせ

メトロームジャパン株式会社

143-0006 東京都大田区平和島6-1-1
東京流通センター アネックス9階

お問い合わせ