Contrôle de la qualité des processus de fermentation

La production de biocarburants à partir de matières premières renouvelables a connu un essor considérable au cours des dernières années. Le bioéthanol est l'une des alternatives les plus intéressantes aux combustibles fossiles, car il peut être produit à partir de matières premières riches en sucres et en amidon. La fermentation de l'éthanol est l'un des processus de fermentation les plus anciens et les plus importants utilisés dans l'industrie biotechnologique. Bien que le processus soit bien connu, il existe un grand potentiel d'amélioration et de réduction proportionnelle des coûts de production. En raison des variations saisonnières de la qualité des matières premières, les producteurs d'éthanol doivent surveiller le processus de fermentation pour s'assurer que le produit obtenu est de même qualité.

La spectroscopie proche infrarouge (NIRS) permet une prédiction rapide et fiable de la teneur en éthanol, en sucres, en Brix, en acide lactique, en pH et en solides totaux à n'importe quel stade du processus de fermentation.

Figure 1. Échantillon de moût de fermentation placé sur l'analyseur de solides DS2500.

La production d'éthanol à partir de maïs passe par trois étapes typiques : le broyage/la liquéfaction du maïs en moût d'amidon, la fermentation du moût d'amidon avec de la levure et, enfin, la purification de l'éthanol obtenu par distillation. Un total de 206 échantillons (117 pour l'indice Brix) de moût de fermentation ont été analysés sur l'analyseur de solides DS2500. En raison de la grande quantité de solides présents dans les échantillons, toutes les mesures ont été effectuées en mode réflexion à l'aide de la grande coupelle d'échantillonnage du DS2500 (figure 1). Les échantillons ont été mesurés en rotation afin de collecter des données spectrales sur plusieurs zones. Le calcul de la moyenne spectrale des signaux provenant de plusieurs points a permis de réduire l'inhomogénéité de l'échantillon. Le logiciel Metrohm Vision Air Complete a été utilisé pour l'acquisition des données et le développement du modèle de prédiction.

**Tableau 1.** Vue d'ensemble des équipements matériels et logiciels
Equipement	Metrohm référence
DS2500 Analyzer	2.922.0010
DS2500 Large Sample Cup	6.7402.050
Vision Air 2.0 Complete	6.6072.208

Les 206 spectres Vis-NIR mesurés (figure 2) ont été utilisés pour créer un modèle de prédiction permettant de quantifier les paramètres clés de la fermentation. La qualité du modèle de prédiction a été évaluée à l'aide de diagrammes de corrélation, qui montrent une très forte corrélation entre la prédiction Vis-NIR et les valeurs de référence. Les figures de mérite respectives (FOM) indiquent la précision attendue d'une prédiction au cours d'une analyse de routine.

Figure 2. Spectres Vis-NIR d'échantillons de moût de fermentation analysés sur un analyseur de solides DS2500.

Résultat teneur en éthanol

Figure 3. Diagramme de corrélation pour la prédiction de la teneur en éthanol à l'aide d'un analyseur de solides DS2500. La valeur de laboratoire de la teneur en éthanol a été évaluée par HPLC.

**Tableau 2.** Chiffres de mérite pour la prédiction de la teneur en éthanol à l'aide d'un analyseur de solides DS2500.
Figures de mérite	Valeur
R²	0.998
Erreur standard d'étalonnage	0.21%
Erreur standard de la validation croisée	0.22%

Résultat contenu solide

Figure 4. Diagramme de corrélation pour la prédiction de la teneur en solides à l'aide d'un analyseur de solides DS2500. La valeur de laboratoire a été évaluée par la balance LOD.

**Tableau 3.** Chiffres de mérite pour la prédiction de la teneur en solides à l'aide d'un analyseur de solides DS2500.
Figures de mérite	Valeur
R²	0.982
Erreur standard d'étalonnage	0.87%
Erreur standard de la validation croisée	1.06%

Résultat Indice brix

Figure 5. Diagramme de corrélation pour la prédiction des valeurs de l'indice Brix. La valeur de laboratoire a été mesurée à l'aide d'un réfractomètre.

**Tableau 4.** Chiffres de mérite pour la prédiction des valeurs de l'indice Brix.
Figures de mérite	Valeur
R²	0.987
Erreur standard d'étalonnage	0.66
Erreur standard de la validation croisée	0.87

Résultat teneur en sucre total

Figure 6. Diagramme de corrélation pour la prédiction de la teneur en sucre total. La valeur de laboratoire de la teneur totale en sucre a été mesurée à l'aide de la CLHP.

**Tableau 5.** Chiffres de mérite pour la prédiction de la teneur en sucre total.
Figures de mérite	Valeur
R²	0.981
Erreur standard d'étalonnage	1.09%
Erreur standard de la validation croisée	1.30%

Résultat Teneur en glucose

Figure 7. Diagramme de corrélation pour la prédiction de la teneur en glucose. La valeur de laboratoire de la teneur en glucose a été mesurée par HPLC.

**Tableau 6.** Chiffres de mérite pour la prédiction de la teneur en glucose.
Figures de mérite	Valeur
R²	0.920
Erreur standard d'étalonnage	0.70%
Erreur standard de la validation croisée	0.86%

Résultat teneur en acide lactique

Figure 8. Diagramme de corrélation pour la prédiction de la teneur en acide lactique. La valeur de laboratoire de l'acide lactique a été évaluée par HPLC.

**Tableau 7.** Chiffres de mérite pour la prédiction de la teneur en acide lactique.
Figures de mérite	Valeur
R²	0.722
Erreur standard d'étalonnage	0.09%
Erreur standard de la validation croisée	0.10%

Résultat Valeur du pH

Figure 9. Diagramme de corrélation pour la prédiction de la valeur du pH. La valeur du pH en laboratoire a été mesurée à l'aide d'un pH-mètre.

**Tableau 8.** Chiffres de mérite pour la prédiction de la valeur du pH.
Figures de mérite	Valeur
R²	0.734
Erreur standard d'étalonnage	0.17
Erreur standard de la validation croisée	0.19

Résultat teneur en maltotriose

Figure 10. Diagramme de corrélation pour la prédiction de la teneur en maltotriose. La valeur de laboratoire du maltotriose a été mesurée par HPLC.

**Tableau 9.** Chiffres de mérite pour la prédiction de la teneur en maltotriose.
Figures de mérite	Valeur
R²	0.928
Erreur standard d'étalonnage	0.36%
Erreur standard de la validation croisée	0.42%

Résultat teneur en dextrine

Figure 11. Diagramme de corrélation pour la prédiction de la teneur en dextrine. La valeur de laboratoire de la dextrine a été mesurée par HPLC.

**Tableau 10.** Chiffres de mérite pour la prédiction de la teneur en dextrine.
Figures de mérite	Valeur
R²	0.964
Erreur standard d'étalonnage	0.60%
Erreur standard de la validation croisée	0.68%

Cette note d'application démontre qu'il est possible de déterminer plusieurs paramètres clés du processus de fermentation à l'aide de la spectroscopie proche infrarouge. La fermentation du maïs est un processus bien établi qui dure généralement de 55 à 60 heures. Des échantillons sont extraits des fermenteurs toutes les quelques heures et envoyés au laboratoire pour des mesures analytiques. Plusieurs méthodes analytiques doivent être utilisées pour contrôler les principaux paramètres de qualité du processus de fermentation. La spectroscopie Vis-NIR permet une alternative rapide avec une grande précision, et représente donc une méthode unique appropriée pour contrôler le processus de fermentation.

**Tableau 11.** Aperçu des délais d'obtention des résultats pour les différents paramètres
Paramètres	Méthode	Délai d'obtention des résultats
Éthanol, sucres	HPLC	∼30–45 min
Indice Brix	Réfractomètre	∼3–5 min
pH	pH-mètre	∼3–5 min
Solides	Équilibre LOD	∼10–15 min

Contact

Metrohm Suisse SA

Industriestrasse 13
4800 Zofingen