Chia sẻ bài viết
Khi quang phổ cận hồng ngoại (NIRS hoặc phổ NIR) đã được tích hợp thành công vào quy trình phân tích của bạn, phòng thí nghiệm của bạn sẽ được hưởng lợi từ phương pháp nhanh, chính xác và không phá hủy để phân tích thường quy. Nhưng bạn nên tiến hành triển khai phổ NIR vào quy trình phòng thí nghiệm của mình như thế nào?
Bài viết này sẽ giúp bạn có cái nhìn tổng quát về các bước cần thiết để triển khai phương pháp NIR trong phòng thí nghiệm của bạn, được trình bày bằng ví dụ thực tế.
Hãy bắt đầu bằng cách đưa ra một vài giả định:
- Doanh nghiệp của bạn sản xuất vật liệu cao phân tử và phòng thí nghiệm đã đầu tư vào máy phân tích NIR để đo độ ẩm nhanh (thay thế cho phương pháp chuẩn độ Karl Fischer) và đo độ nhớt nội tại nhanh (thay thế cho phép đo bằng nhớt kế)
- Phòng thí nghiệm vừa mới nhận được thiết bị phòng thí nghiệm NIR mới ví dụ thiết bị NIRS DS2500 Analyzer.
Cả việc xác định độ ẩm và đo độ nhớt nội tại đều là ví dụ về phân tích định lượng. Trong hầu hết các trường hợp, quang phổ NIR không thể được sử dụng ngay lập tức cho phân tích này, vì trước tiên cần phải tạo hiệu chuẩn NIR (hoặc mô hình dự đoán).
Như thể hiện trong Hình 1, các bước để triển khai quang phổ NIR bao gồm:
Bước 1: Tạo bộ hiệu chuẩn
Trong phần đầu tiên của loạt bài này (Quang phổ Cận Hồng Ngoại là gì?), Quang phổ cận hồng ngoại - NIR là một phương pháp thứ cấp, có nghĩa là nó yêu cầu «đào tạo» với một tập hợp các phổ tương ứng với các giá trị tham số lấy từ một phương pháp chính (chẳng hạn như chuẩn độ). Trong ví dụ sắp tới để phân tích độ ẩm và độ nhớt nội tại, các phương pháp chính là chuẩn độ Karl Fischer và độ nhớt. Trong trường hợp này, các giá trị từ các phân tích chính được biết đến.
Để phương pháp này có hiệu quả, các mẫu của bộ hiệu chuẩn này phải bao gồm phạm vi nồng độ dự kiến xây dựng của các thông số được thử nghiệm để phương pháp trở nên mạnh mẽ. Các giá trị của nồng độ được lấy từ các kỹ thuật khác (ví dụ, HPLC) trong đó đường chuẩn cần trải rộng phạm vi nồng độ dự kiến. Do đó, nếu bạn mong đợi độ ẩm của một chất nằm trong khoảng từ 0,35% đến 1,5%, thì bộ đào tạo / hiệu chuẩn cũng phải bao gồm phạm vi này.
Sau khi đo các mẫu trên máy phân tích cận hồng ngoại NIRS DS2500 Analyzer. Sau đó, liên kết kết quả từ phép đo NIR với các giá trị thu được từ các phương pháp chính (chuẩn độ Karl Fischer và độ nhớt) trên cùng một mẫu bằng phần mềm. Ví dụ, chỉ cần nhập giá trị độ ẩm và độ nhớt bằng phẩn mềm Metrohm Vision Air Complete (Hình 2). Sau đó, dữ liệu quang phổ này (bộ hiệu chuẩn) được sử dụng để phát triển mô hình dự đoán.
Cần bao nhiêu mẫu hoặc phổ?
Số lượng phổ lý tưởng trong một bộ hiệu chuẩn phụ thuộc vào sự thay đổi trong mẫu (kích thước hạt, phân phối hóa học, v.v.). Trong ví dụ này, chúng tôi đã sử dụng 10 mẫu polyme, đây là điểm khởi đầu tốt để kiểm tra tính khả thi của một ứng dụng.
Tuy nhiên, để xây dựng một bộ hiệu chuẩn mạnh mẽ bao gồm tất cả các biến thể mẫu và đảm bảo phân tích định lượng đáng tin cậy, cần nhiều phổ mẫu hơn. Theo quy tắc, khoảng 40–50 phổ mẫu cung cấp mô hình dự đoán phù hợp trong hầu hết các trường hợp.
Bộ dữ liệu bao gồm 40–50 phổ cũng được sử dụng để xác thực mô hình dự đoán. Ví dụ, điều này có thể được thực hiện bằng cách sử dụng gói phần mềm Metrohm Vision Air Complete, chia bộ dữ liệu thành hai nhóm mẫu:
- Tập phổ hiệu chuẩn chiếm 75%
- Tập phổ thẩm định chiếm 25%
Bước 2: Tạo và thẩm định các mô hình dự đoán
Tạo mô hình dự đoán
Bây giờ bộ hiệu chuẩn đã được đo trên phạm vi giá trị mong đợi, cần phải tạo một mô hình dự đoán. Bước này còn được gọi là phát triển mô hình hiệu chuẩn NIR. Đừng lo lắng - tất cả các thủ tục được phát triển và thực hiện đầy đủ trong phần mềm Metrohm Vision Air Complete. Đầu tiên, kiểm tra phổ bằng mắt thường để xác định các vùng thay đổi với nồng độ khác nhau. Thông thường, việc áp dụng một điều chỉnh toán học (chẳng hạn như đạo hàm bậc nhất hoặc bậc hai) sẽ nâng cao khả năng hiển thị của sự khác biệt phổ (Hình 3).
Sau khi xác định bằng mắt thường, phần mềm sẽ cố gắng tương quan các vùng phổ đã chọn với các giá trị được lấy từ phương pháp chính. Kết quả là một biểu đồ tương quan, bao gồm các số liệu tương ứng, đó là Sai số chuẩn của việc hiệu chuẩn (SEC, độ chính xác) và hệ số tương quan (R2). Hình 4 hiển thị ví dụ về sơ đồ tương quan cho độ ẩm. Quy trình tương tự được thực hiện cho các thông số khác (trong trường hợp này là độ nhớt nội tại).
Phân tích dữ liệu đơn biến so với đa biến
Quá trình này một lần nữa tương tự như các quy trình làm việc với HPLC. Khi tạo đường chuẩn với HPLC, thông thường chiều cao pic hoặc cường độ pic (bề mặt) được liên kết với nồng độ chất chuẩn nội đã biết. Ở đây, chỉ một biến được sử dụng (chiều cao đỉnh hoặc bề mặt), do đó quy trình này được gọi là «phân tích dữ liệu đơn biến».
Mặt khác, quang phổ cận hồng ngoại - NIR là một công nghệ «phân tích dữ liệu đa biến». Thiết bị quang phổ cận hồng ngoại NIRS sử dụng một dải quang phổ (ví dụ: 1900–2000 nm đối với nước) và do đó nhiều giá trị độ hấp thụ được sử dụng để tạo ra mối tương quan.
Xác thực mô hình dự đoán
Như trước đây, một mô hình dự đoán được tạo bằng cách sử dụng bộ phổ hiệu chuẩn, nhưng các dự đoán bây giờ sẽ được thẩm định bằng cách sử dụng bộ phổ thẩm định. Kết quả cho các mẫu polyme này được thể hiện ở trên trong Hình 4. Người dùng chưa có kinh nghiệm với việc tạo mô hình trên thiết bị quang phổ cận hồng ngoại và chưa cảm thấy tự tin với nó có thể nhờ đến sự hỗ trợ của Metrohm, công ty được biết đến với dịch vụ chất lượng cao. Họ sẽ hỗ trợ bạn tạo và xác thực mô hình dự đoán.
Bước 3: Phân tích hàng ngày
Sự hoàn hảo của kỹ thuật NIRS trở thành tiêu điểm khi mô hình dự đoán đã được tạo ra và thẩm định. Các mẫu polyme có độ ẩm chưa xác định và độ nhớt nội tại chưa biết giờ đây có thể được phân tích chỉ bằng một nút nhấn. Máy phân tích cận hồng ngoại NIRS DS2500 sẽ hiển thị kết quả cho các thông số đó trong vòng chưa đầy một phút
Tùy chọn hiển thị
Thông thường, phổ không được hiển thị trong bước này - chỉ là kết quả - đôi khi được đánh dấu bằng hộp màu vàng hoặc đỏ để chỉ ra kết quả có cảnh báo hoặc lỗi như trong Hình 5.
Tất nhiên, cũng có tùy chọn để hiển thị quang phổ, nhưng đối với hầu hết người dùng (đặc biệt là những người làm việc theo ca), những quang phổ này không có ý nghĩa gì và họ không thể lấy được thông tin từ chúng. Trong những trường hợp này, chỉ các giá trị số là quan trọng cùng với chỉ báo đạt / không đạt rõ ràng.
Một khả năng hiển thị khác là biểu đồ xu hướng, cho phép chủ động điều chỉnh các quy trình sản xuất. Cảnh báo và giới hạn hành động cũng được đánh dấu ở đây (Hình 6).
Tóm tắt
Phần lớn điều cần thiết để thực hiện trên hệ thống quang phổ cận hồng ngoại NIRS trong phòng thí nghiệm là ở giai đoạn đầu của quy trình làm việc, trong quá trình thu thập và đo lường các mẫu nằm trong phạm vi nồng độ hoàn chỉnh. Việc tạo và thẩm định mô hình dự đoán, cũng như thực hiện trong phân tích thông thường, được thực hiện với sự trợ giúp của phần mềm Metrohm Vision Air Complete và có thể được hoàn thành trong thời gian ngắn. Ngoài ra, các chuyên gia Metrohm NIRS của chúng tôi sẽ sẵn lòng hỗ trợ bạn trong việc tạo mô hình dự đoán nếu bạn cần hỗ trợ.
Tại thời điểm này, lưu ý rằng có những trường hợp quang phổ cận hồng ngoại NIR có thể được thực hiện trực tiếp mà không cần phát triển mô hình dự đoán nào bằng cách sử dụng đường chuẩn dựng sẵn từ Metrohm. Đây là các quy trình vận hành mạnh mẽ, sẵn sàng sử dụng cho các ứng dụng nhất định (ví dụ: độ nhớt của PET) dựa trên phổ của sản phẩm thực.
Chúng tôi trình bày và thảo luận về đặc điểm và lợi thế của kỹ thuật trong bài viết tiếp theo
Your knowledge take-aways
Learn more about our NIR spectrometers for lab and process analysis, as well as Raman solutions
Learn more about selected NIR applications in the polymer industry
